细胞培养基本条件

细胞培养基本条件

发布时间:2020-12-23


1合适的细胞培养基

合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的重要的条件之一培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。

2血清

目前大多数合成培养基都需要添加血清血清是细胞培养液中重要的成分之一含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。

3无菌无毒细胞培养环境

无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件

在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力一旦被微生物或有毒物质污染或者自身代谢物质积累可导致细胞中毒死亡因此在体外培养细胞时必须保持细胞生存环境无菌无毒及时清除细胞代谢产物。

4恒定的细胞生长温度

维持培养细胞旺盛生长必须有恒定而适宜的温度不同种类的细胞对培养温度要求也不同人体细胞培养的标准温度为365℃±05偏离这一温度范围细胞的正常代谢会受到影响甚至死亡

培养细胞对低温的耐受力较对高温强温度上升不超过39℃时细胞代谢与温度成正比人体细胞在39-401小时即能受到一定损伤但仍有可能恢复40-411小时细胞会普遍受到损伤仅小半数有可能恢复41-421小时细胞受到严重损伤大部分细胞死亡个别细胞仍有恢复可能当温度在43℃以上1小时细胞全部死亡

相反温度不低于0℃时对细胞代谢虽有影响但并无伤害作用把细胞放入25-35℃时细胞仍能生存和生长但速度减慢放在4℃数小时后再回到37℃培养细胞仍能继续生长细胞代谢随温度降低而减慢当温度降至冰点以下时细胞可因胞质结冰受损而死亡

但是如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油)可在深低温下如-80℃或-196℃(液氮)长期保存。

5合适的气体环境

气体是哺乳动物细胞培养生存必需条件之一所需气体主要有氧气和二氧化碳。


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